通过认证
“原核蛋白表达实验实例——pCzn1质粒+Arctic Express宿主菌低温表达体系”参数说明
| 种类： | 定制蛋白 | 形态： | 液体 |
“原核蛋白表达实验实例——pCzn1质粒+Arctic Express宿主菌低温表达体系”详细介绍
利用基因合成、cDNA克隆、反转录等方法，获得目的基因，将目的基因亚克隆至表达载体pCzn1，目的基因在N端融合His标签蛋白，通过测序和酶切验证，确证获得亚克隆正确的表达质粒。
利用构建好的表达质粒，转化Arctic Express宿主菌， 在11度低温IPTG诱导条件下，SDS-PAGE检测目标蛋白表达情况，确认蛋白分布在上清或是沉淀中。
如果目标蛋白产物分布与上清中，通过Ni柱亲和纯化， 获得目的蛋白；如果目标蛋白分布于沉淀中，则通过包涵体梯度洗脱后，重溶获得目标蛋白，必要的话，重溶蛋白在进一步通过亲和纯化提高纯度。
利用构建好的表达质粒，转化Arctic Express宿主菌， 在11度低温IPTG诱导条件下，SDS-PAGE检测目标蛋白表达情况，确认蛋白分布在上清或是沉淀中。
如果目标蛋白产物分布与上清中，通过Ni柱亲和纯化， 获得目的蛋白；如果目标蛋白分布于沉淀中，则通过包涵体梯度洗脱后，重溶获得目标蛋白，必要的话，重溶蛋白在进一步通过亲和纯化提高纯度。
